蛋白質濃度計算器
輸入 280 nm 吸光度、摩爾消光系數、分子量、稀釋倍數與光程，依 Beer-Lambert 定律即時算出蛋白質濃度（mg/mL 與摩爾濃度），附常見蛋白質參數對照表。
輸入資料
計算結果
重點速覽：蛋白質濃度可由紫外線吸光度快速估計：芳香族胺基酸（色胺酸、酪胺酸）在 280 nm 有特徵吸收。依 Beer–Lambert 定律 A = ε·c·b，先解出摩爾濃度 c = A / (ε·b)，再乘以分子量 MW 換算成質量濃度（mg/mL），乘稀釋倍數 n 還原原液濃度：C = A / (ε·b) × MW × n。
計算公式
摩爾濃度：c = A ÷ (ε × b)（mol/L）。
質量濃度：C = c × MW × n（mg/mL，因 g/L = mg/mL）。
合併：C = A ÷ (ε × b) × MW × n。
$$A = \varepsilon \, c \, b$$$$C = \dfrac{A}{\varepsilon \, b} \times \mathrm{MW} \times n$$使用說明
- 輸入蛋白質在 280 nm 的吸光度 A。
- 輸入該蛋白的摩爾消光系數 ε 與分子量 MW（可查表或以序列估算），並填稀釋倍數與光程。
- 右側即時顯示質量濃度（mg/mL）與摩爾濃度（mol/L）。
常見蛋白質的摩爾消光系數與分子量參考
| 蛋白質 | ε₂₈₀（M⁻¹cm⁻¹） | 分子量（g/mol） |
|---|---|---|
| 牛血清白蛋白 BSA | 43824 | 66463 |
| 免疫球蛋白 IgG | 210000 | 150000 |
| 溶菌酶 Lysozyme | 38940 | 14313 |
| 細胞色素 c | 驗證依來源 | 12384 |
消光系數會因摺疊狀態與溶劑而略有差異；精確定量宜以 BCA 或 Bradford 法交叉驗證。
理財情境案例
純化後 BSA 定量
純化 BSA 後測得 A280 = 0.5、光程 1 cm、未稀釋（n=1）。以 ε=43824、MW=66463 代入。
c = 0.5 ÷ (43824 × 1) = 1.141×10⁻⁵ mol/L；C = 1.141×10⁻⁵ × 66463 ≈ 0.758 mg/mL。
此濃度即可用於後續實驗的體積換算，或判斷是否需濃縮。
抗體 IgG 高濃度樣品
抗體原液吸光度過高，稀釋 2 倍後測得 A = 1.4（以 ε=210000、MW=150000 示範）。
還原原液：C = 1.4 ÷ (210000 × 1) × 150000 × 2 = 2.0 mg/mL。
務必記錄稀釋倍數並代入 n，否則濃度會低估一半。
常見問題
為什麼蛋白質在 280 nm 有吸收？
因為色胺酸（Trp）與酪胺酸（Tyr）等芳香族胺基酸的側鏈在 280 nm 有紫外吸收，含這些殘基越多，消光系數 ε 越大。缺乏芳香族胺基酸的蛋白質則不適用此法。
摩爾消光系數 ε 從哪裡取得？
可由胺基酸序列以 ExPASy ProtParam 等工具估算（依 Trp、Tyr、胱胺酸數目），或查文獻表值。ε 越準確，濃度估算越可靠。
算出的 mg/mL 和摩爾濃度怎麼互換？
質量濃度（mg/mL 即 g/L）= 摩爾濃度（mol/L）× 分子量（g/mol）。本計算器兩者都會輸出，方便對照。
UV 法和 Bradford／BCA 法哪個準？
UV(A280) 法快速、不耗樣品但需已知 ε；Bradford／BCA 為比色法，需標準曲線但對未知蛋白較通用。精確定量時常以兩法交叉驗證。
吸光度太高（>1.5）怎麼辦？
超出線性範圍會低估濃度，應把樣品稀釋後再量，並在「稀釋倍數 n」填入實際倍數，系統會自動還原原液濃度。
相關工具
參考資料
內容審核：香港計算器科學團隊。蛋白質吸光度定量以 Beer-Lambert 定律為基礎，消光系數與分子量參考標準生物化學教材。