RNA 拷貝數計算器
輸入 RNA 質量、核苷酸長度與每 nt 平均摩爾質量，即時算出 RNA 分子拷貝數，適用於 qRT-PCR 標準品與 IVT 定量。
輸入資料
計算結果
重點速覽：RNA 拷貝數（RNA copy number）是某質量 RNA 中所含的分子數，是 qRT-PCR 絕對定量建立標準曲線的核心。由摩爾數（質量 ÷ 摩爾質量）乘以阿伏伽德羅常數即得分子數。單鏈 RNA 每核苷酸平均摩爾質量約 320.5 g/mol，故 RNA 分子的摩爾質量 ≈ 長度（nt）× 320.5，拷貝數 = 質量 × 6.022×10²³ ÷ (長度 × 10⁹ × 320.5)（質量以 ng 計）。
計算公式
RNA 摩爾質量：MW ≈ 長度（nt）× 每 nt 摩爾質量（約 320.5 g/mol）。
摩爾數：n = 質量（g）÷ MW（質量_ng × 10⁻⁹ 轉為 g）。
拷貝數 = n × 6.022×10²³。
$$N = \dfrac{m_{ng} \times 6.022\times10^{23}}{L_{nt} \times 10^{9} \times g_{nt}}$$$$g_{nt} \approx 320.5 \text{ g/mol}$$使用說明
- 填入 RNA 質量（ng）與核苷酸長度（nt）。
- 確認每 nt 平均摩爾質量（一般用 320.5 g/mol）。
- 右側即時顯示 RNA 分子拷貝數。
常見 RNA 質量與長度對應拷貝數（320.5 g/nt）
| RNA 質量（ng） | 長度（nt） | 拷貝數 |
|---|---|---|
| 100 | 1,000 | 1.88 × 10¹¹ |
| 100 | 1,500 | 1.25 × 10¹¹ |
| 50 | 1,000 | 9.40 × 10¹⁰ |
| 10 | 2,000 | 9.40 × 10⁹ |
| 1 | 1,000 | 1.88 × 10⁹ |
同質量下，RNA 越長分子數越少（摩爾質量越大）；配製 qRT-PCR 標準品時常換算成每反應的拷貝數再做 10 倍連續稀釋。
理財情境案例
qRT-PCR 標準品拷貝數
體外轉錄得到一段 1,500 nt 的 RNA 標準品，濃度 100 ng/µL。
每 µL 拷貝數 = 100 × 6.022×10²³ ÷ (1500 × 10⁹ × 320.5) ≈ 1.25 × 10¹¹ copies。
以此為起點做 10 倍連續稀釋（10¹⁰、10⁹…），即可建立橫跨多個數量級的絕對定量標準曲線。
微量樣品的分子數
一段 1,000 nt 的 mRNA，純化後僅得 50 ng。
拷貝數 = 50 × 6.022×10²³ ÷ (1000 × 10⁹ × 320.5) ≈ 9.4 × 10¹⁰ copies。
換算後可評估後續反應（如逆轉錄、文庫建構）投入的分子起始量是否充足。
常見問題
為什麼 RNA 用 320.5 而 DNA 用 650 g/mol？
320.5 g/mol 是單鏈 RNA 每個核苷酸的平均摩爾質量；而 dsDNA 每「鹼基對」含兩條鏈共約 650 g/mol。因此 RNA 以核苷酸（nt）長度、每 nt 320.5 計算，DNA 以鹼基對（bp）長度、每 bp 650 計算，兩者不可混用。
質量要填 ng 還是其他單位？
本計算器質量以奈克（ng）為輸入，公式內已含 10⁹ 轉換為克。若你的數據是 µg，乘 1000 換成 ng；若是 pg，除以 1000。長度以核苷酸數（nt）填入。
體外轉錄（IVT）產物的長度怎麼定？
用轉錄模板決定的實際轉錄本長度（含加尾與 5' 帽相關序列時一併計入）。若做過瓊脂糖凝膠或生物分析儀確認條帶大小，以量測到的核苷酸數為準，能得到更準確的拷貝數。
拷貝數換算和分光光度計 A260 定量有何關係？
A260 測得的是 RNA 的質量濃度（ng/µL），本計算器再把質量換成分子數。兩步結合流程為：A260 → 質量濃度 → 依長度換算拷貝數。若 260/280 比值偏離約 2.0，代表有蛋白或酚污染，會使質量與拷貝數估算偏差。
為什麼標準曲線常用拷貝數而非質量？
絕對定量要回答「樣品中有多少分子」，拷貝數才是可比較的物理量。不同長度的轉錄本在相同質量下分子數差異很大，直接用 ng 無法跨基因比較。換算成拷貝數後，再做 10 倍連續稀釋建立標準曲線，即可由 Ct 值反推未知樣品的分子數。
相關工具
參考資料
內容審核：香港計算器科學團隊。RNA 拷貝數公式與每 nt 摩爾質量參考標準分子生物實驗手冊。