香港計算器

細胞密度計算器

輸入血球計數板每大方格平均細胞數、稀釋倍數與樣品體積,即時算出細胞密度(cells/mL)與細胞總數,適用於細胞培養與繼代計數。

輸入資料

血球計數板四角(或指定)大方格所數細胞的平均值。每個大方格體積為 0.1 μL。
上樣前的稀釋倍數,例如 1:1 混台盼藍(trypan blue)填 2。未稀釋填 1。
細胞懸液總體積(mL),用於估算細胞總數。只想看密度可填 0。
mL

計算結果

1,700,000cells/mL
17,000,000cells

重點速覽:細胞密度(cells per mL)是每毫升細胞懸液所含的細胞數,是細胞培養最基本的定量指標,用於繼代分種、種板密度控制與活力評估。以 Neubauer 血球計數板計數時,單一大方格體積為 0.1 μL(10⁻⁴ mL),因此細胞密度 = 每大方格平均細胞數 × 稀釋倍數 × 10⁴。乘以懸液總體積即得細胞總數。

計算公式

細胞密度:density = 平均細胞數 × 稀釋倍數 × 10⁴(cells/mL)。

10⁴ 來自大方格體積 0.1 μL = 10⁻⁴ mL 的倒數。

細胞總數:total = density × 樣品體積(mL)。

$$\text{density} = \bar{N} \times DF \times 10^{4}$$
$$\text{total} = \text{density} \times V$$

使用說明

  1. 在血球計數板數四個角(或指定)大方格的細胞,取平均值填入。
  2. 填入上樣前的稀釋倍數(如與台盼藍 1:1 混合填 2)與懸液總體積。
  3. 右側即時顯示細胞密度(cells/mL)與細胞總數。

常見平均細胞數換算密度(稀釋 2 倍)

常見平均細胞數換算密度(稀釋 2 倍)
每大方格平均稀釋倍數細胞密度(cells/mL)
2525.0 × 10⁵
5021.0 × 10⁶
8521.7 × 10⁶
12022.4 × 10⁶
20024.0 × 10⁶

每大方格細胞數建議控制在 20–200 之間;過密應先稀釋再計數,以降低疊加誤差。

理財情境案例

繼代分種計算

與台盼藍 1:1 混合後計數,四角大方格分別數到 80、90、82、88,平均 = 85。

細胞密度 = 85 × 2 × 10⁴ = 1.7 × 10⁶ cells/mL;懸液共 10 mL,總細胞 = 1.7 × 10⁷。

若欲以 3 × 10⁵ cells/well 種 6 孔盤(每孔 2 mL),每孔需 6 × 10⁵ 細胞,取 ≈ 0.35 mL 懸液補足培養液即可。

活力(活細胞率)評估

台盼藍染色後,未染色(活)細胞平均 85、染色(死)細胞平均 5。

活細胞密度 = 85 × 2 × 10⁴ = 1.7 × 10⁶ cells/mL;總細胞平均 90。

細胞活力 = 85 ÷ 90 ≈ 94%,種板時以活細胞密度為準避免高估接種量。

常見問題

為什麼要乘 10⁴?

Neubauer 血球計數板單一大方格(1 mm × 1 mm,蓋玻片下深 0.1 mm)體積為 0.1 μL = 10⁻⁴ mL。要換算成每毫升,需除以此體積,即乘以 10⁴。故密度 = 平均細胞數 × 稀釋倍數 × 10⁴。

應該數幾個大方格?

標準做法是數計數板四個角的大方格(各含 16 小格),取平均值提高代表性。若細胞很密,可只數對角兩格或先稀釋。跨在方格線上的細胞採「數上、數左,不數下、不數右」的一致規則避免重複。

稀釋倍數要怎麼填?

填上樣前的總稀釋倍數。與台盼藍 1:1 混合(各 50 μL)即 2 倍稀釋,填 2;取 10 μL 懸液加 90 μL 稀釋液則填 10。未做任何稀釋填 1。稀釋能讓過密的樣品落在可準確計數的範圍。

細胞總數怎麼算?

細胞總數 = 細胞密度 × 懸液總體積(mL)。例如密度 1.7 × 10⁶ cells/mL、體積 10 mL,總細胞 = 1.7 × 10⁷。這個數字用於規劃可接種的培養瓶數或凍存管數。只想看密度可把體積填 0。

自動細胞計數儀和手動計數板結果一樣嗎?

原理相同(固定體積內計數換算每毫升),自動儀器速度快、重現性高,但對碎片與聚集敏感。手動血球計數板成本低、可肉眼判讀活力,仍是實驗室黃金標準。兩者結果通常一致,差異多來自樣品是否充分混勻與稀釋是否適當。

相關工具

參考資料

內容審核:香港計算器科學團隊。血球計數板換算公式參考標準細胞培養實驗手冊。